<BK0061/BK0062/BK0063/BK0064> ACE 一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒

欄目：蛋白預制膠

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本產品適用于 Tris- Glycine電泳體系，包含制備濃縮膠（上層膠）和分離膠（下層膠）的預混溶液，配膠過程無需計算各組分的用量、無需稀釋、無需添加 TEMED，只需將上層膠溶液與上層膠緩沖液、下層膠溶液與下層膠緩沖液分別 1：1混合，加入促凝劑即可凝膠，簡化制備 SDS-PAGE凝膠的操作步驟，可快速灌制多塊凝膠，使制膠過程更加便捷。上層膠帶有顏色使上樣孔清晰可見，便于上樣。本產品配套提供的促凝劑干粉狀態保存于 2-8℃，溶解后應保存于-20℃。

一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒

產品線	產品目錄名稱	規格	貨號	目錄價
蛋白電泳	8% 一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒	250ml	BK0061-01	300
	10% 一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒	250ml	BK0062-01	300
	12% 一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒	250ml	BK0063-01	300
	15% 一步法PAGE彩色凝膠快速制備試劑盒	250ml	BK0064-01	300

產品介紹

產品特點：

1）一步法灌制膠 —依次灌制下層膠和上層膠即可完成制膠；

2）操作簡單快速 —制膠無需計算各組分用量和準備額外試劑，且凝膠快速；

3）上層膠為彩色 —彩色的上層膠，便于上樣；

4）避免惡臭氣味 —無需添加 TEMED，免除臭味擴散。

保存條件

產品可在 2~8℃條件下保存一年。

產品組分

組分名稱	體積	儲存溫度
下層膠溶液（膠液 A）	250 mL	2–8°C
下層膠緩沖液（緩沖液 A）	250 mL	2–8°C
上層膠溶液（膠液 B）	100 mL	2–8°C
上層膠緩沖液（緩沖液 B）	100 mL	2–8°C
促凝劑	8 mL × 2	干粉：2–8°C；溶解后：-20°C

注意：

① 向裝有促凝劑干粉的瓶子中加入 8 ml的 ddH₂O，搖晃溶解，溶解后的促凝劑，建議分裝保存于-20℃；每次使用前需完全融化后，再使用。

② 為保證試劑盒的長時間使用，本試劑盒額外配備一瓶促凝劑干粉，兩瓶促凝劑干粉的使用方法一致。

③ 建議一瓶促凝劑干粉使用完之后，再溶解另一瓶。

使用說明

將制膠玻璃板（務必檢查是否對應正確，例如灌注的是 1.0 mm的膠，那么一定要用對應的 1.0 mm的玻璃板）清洗干凈，裝配好，以制備一塊 mini膠為例（建議先制備下層膠，等下層膠凝固好，再制備上層膠混合液，然后進行上層膠的灌注）：

1 下層膠的制備：

按照“下層膠配制建議（單片膠）”表格中的用量，根據需要配制的凝膠厚度，分別進行下層膠各個組分的取液。

① 取等體積的膠液 A和緩沖液 A，加入到容器中，輕輕搖晃混勻。

② 在混合溶液中加入促凝劑，輕輕搖晃混勻，避免劇烈震蕩出現過多的氣泡。

③ 將上述混勻后的溶液灌注到裝配好的制膠玻璃板中，根據所用梳齒長度不同，灌注的液面應在插入的梳齒頂端以下 0.5cm為宜（為避免損耗，此步驟配制的溶液為過量，請勿全部注入）。

④ 建議用 ddH₂O對灌注的下層膠進行封閉（封閉可獲得更加平整的上下層膠分界線，可以獲得更好的跑膠效果）。在下層膠灌注到玻璃板之后，立即在下層膠液面上緩緩注入 ddH₂O，直至與玻璃膠板短板上沿齊平。

⑤ 等待下層膠凝固后（約為 10 min）倒去上方 ddH₂O，再進行上層膠的制備。

2 上層膠的制備：

按照“上層膠配制建議（單片膠）”表格中的用量，根據需要配制的凝膠厚度，分別進行上層膠各個組分的取液。

① 取等體積的膠液 B和緩沖液 B，加入到容器中，輕輕搖晃混勻。

② 在混合溶液中加入促凝劑，輕輕搖晃混勻，避免劇烈震蕩出現過多的氣泡。

③ 將上述混勻后的溶液輕緩灌注到制膠玻璃板中，直至與玻璃膠板短板上沿齊平，插入對應的梳子（務必檢查使用的梳子是否正確，例如灌注的是 1.0mm的膠，那么一定要用對應的 1.0 mm梳子）。

④ 等待上層膠凝固后（約為 10 min），即可輕輕拔出梳子進行電泳。

下層膠配制建議（單片膠）

凝膠厚度	下層膠溶液（膠液 A）	下層膠緩沖液（緩沖液 A）	促凝劑（APS）
0.75 mm	2.0 mL	2.0 mL	40 μL
1.00 mm	2.7 mL	2.7 mL	60 μL
1.50 mm	4.0 mL	4.0 mL	80 μL

上層膠配制建議（單片膠）

凝膠厚度	上層膠溶液（膠液 B）	上層膠緩沖液（緩沖液 B）	促凝劑（APS）
0.75 mm	0.50 mL	0.50 mL	10 μL
1.00 mm	0.75 mL	0.75 mL	15 μL
1.50 mm	1.00 mL	1.00 mL	20 μL

備注：

① 在下層膠灌注后，如果選擇不封閉，那么無需等待下層膠凝固，可以直接進行上層膠的灌注（但是由于此時下層膠尚未凝固，所以在灌注上層膠時，一定要保證操作輕緩，避免將上層膠混合溶液沖入到下層膠混合溶液中，造成灌注的凝膠不均勻）。灌注后，插上對應的梳子，室溫靜置，等待上/下層膠凝固（約為 10min）后，即可輕輕拔出梳子進行電泳。

② 溫度與凝固的速度有顯著的正相關性。在相同條件下，隨著溫度升高，凝固速度加快。實際操作中可根據氣溫適當調整促凝劑的用量，以達到合適的凝固效果。不同氣溫條件下促凝劑的使用量建議可以參考下表：

不同氣溫下層膠促凝劑使用量建議（單片膠）

凝膠厚度	T < 10°C	10°C ≤ T < 20°C	20°C ≤ T < 25°C	T ≥ 25°C
0.75 mm	60 μL	48 μL	40 μL	24 μL
1.00 mm	90 μL	72 μL	60 μL	36 μL
1.50 mm	120 μL	96 μL	80 μL	48 μL

不同氣溫上層膠促凝劑使用量建議（單片膠）

凝膠厚度	T < 10°C	10°C ≤ T < 20°C	20°C ≤ T < 25°C	T ≥ 25°C
0.75 mm	15 μL	12 μL	10 μL	6 μL
1.00 mm	22.5 μL	18 μL	15 μL	9 μL
1.50 mm	30 μL	24 μL	20 μL	12 μL