Anti HA Antibody-HRP抗體
產(chǎn)品線 | 產(chǎn)品目錄名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) | 目錄價(jià) |
快速Western Blot | Anti HA Antibody-HRP | 20μl | BP5015-01 | 300 |
100μl | BP5015-02 | 900 | ||
1ml | BP5015-03 | 5400 |
產(chǎn)品介紹
血凝素 (英文hemagglutinin) 是指紅血球凝聚素,血凝素具有免疫原性,抗血凝素抗體可以中和血凝素。HA標(biāo)簽是一段來(lái)源于人流感病毒 血凝素蛋白第98~106位氨基酸的短序列,氨基酸序列為YPYDVPDYA,HA標(biāo)簽的分子量為1.1 KDa,是目前廣泛應(yīng)用的標(biāo)簽之一。通過(guò)重 組DNA技術(shù)將HA標(biāo)簽融合到目的蛋白的C端或N端,有利于對(duì)目的蛋白進(jìn)行純化和檢測(cè)??笻A標(biāo)簽的抗體能對(duì)HA標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行 準(zhǔn)確的檢測(cè)和純化,通過(guò)一定的工藝將辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)至HA標(biāo)簽抗體上,進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)時(shí)加入發(fā)光液A和B,一般是魯米諾和 過(guò)氧化氫,在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的催化作用下,魯米諾與過(guò)氧化氫反應(yīng)生成一種過(guò)氧化物,過(guò)氧化物不穩(wěn)定隨即分解,形成一種能發(fā)光的 電子激發(fā)中間體,當(dāng)后者由激發(fā)態(tài)返回至基態(tài),就會(huì)產(chǎn)生熒光,實(shí)現(xiàn)對(duì)HA標(biāo)簽融合蛋白的快速檢測(cè)。
基本信息
抗體來(lái)源:重組抗體
交叉反應(yīng):HA標(biāo)簽融合蛋白
克隆類型:?jiǎn)慰寺】贵w
偶聯(lián)物:辣根過(guò)氧化物酶(HRP)
純化方式:rProtein A親和純化
儲(chǔ)存緩沖液:1×PBS (pH7.4) ,0.05% proclin300,50%甘油
產(chǎn)品應(yīng)用
WB=1:30000-1:100000
ELISA=1:5000-1:10000
注意事項(xiàng)
1) 本產(chǎn)品為HRP直標(biāo)抗體,需要避光保存于-20℃或者-80℃中;
2) 本產(chǎn)品靈敏度高,WB稀釋比值請(qǐng)按照說(shuō)明書進(jìn)行,否則可能會(huì)出現(xiàn)非特異性條帶;
3) NC膜或者PVDF膜在轉(zhuǎn)膜前需要用甲醇激活,轉(zhuǎn)膜后抗體稀釋液盡量過(guò)量,轉(zhuǎn)膜和抗體孵育過(guò)程中不要產(chǎn)生氣泡;
4) 本品在37℃下孵育30min-60min即可產(chǎn)生很明顯的信號(hào),常溫孵育可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。
參考信息
1) 表達(dá)系統(tǒng):293細(xì)胞分泌表達(dá);
2) 蛋白信息:帶有HA標(biāo)簽的重組蛋白,大小≈55KDa;
3) 上樣順序:1為約含有10ng目的蛋白的培養(yǎng)基原樣,2為10ng純化后的目的蛋白,3為牛血清白蛋白(BSA);
4) 抗體稀釋液體積:10ml;
5) 抗體孵育條件:37℃搖晃孵育30min;
6) 顯色:ECL進(jìn)行顯色;
7) 結(jié)論:Anti HA Antibody-HRP 按照 1:10000,1:30000 和1:100000稀釋后(抗體稀釋體積10ml)37℃搖晃孵育30min,能夠看到很 明顯的信號(hào),目的條帶位置在55KDa,隨著稀釋比值的增大,信號(hào)值會(huì)有下降,我們推薦客戶使用1:30000的梯度進(jìn)行抗體稀釋。
儲(chǔ)存條件
干冰運(yùn)輸,-20℃可保存2年,避免反復(fù)凍融