植物基因組DNA提取試劑盒（離心柱法）

產品介紹 

本試劑盒采用DNA吸附柱和新型獨特的緩沖液系統，適用于從含酚類、多糖類和酶抑制物的植物樣本中快速簡單地提取基因組DNA。離心吸附 柱中采用的硅基質材料為新型材料，高效、專一吸附DNA，可有效去除雜質蛋白。提取過程不需要用到有毒的酚氯仿等有毒化學品，提取的基因 組DNA完整性好，純度高，質量穩定可靠。純化的DNA可直接用于酶切、PCR、文庫構建、Sourthern雜交等實驗。

注意事項

1 使用前檢查各組分是否出現沉淀。若有，請輕輕搖晃混合均勻，或37℃水浴重新溶解。 

2 使用前請將DTT全部加入到裂解液 PA中去，并置于4℃保存，保質期6個月。 

3 RNase(20mg/ml) 請置于-20℃保存。 

4 沉淀緩沖液使用前請放置冰上預冷。

5 洗滌液I和洗滌液II使用前請按標簽提示加入無水乙醇，混合均勻，并在瓶子上做好標記。 

6結合液為異丙醇，請自備。

使用流程

樣本預處理

1 稱取新鮮植物組織樣本100mg或干重組織約30mg（種子樣本建議起始用量10 mg），加入液氮，充分研磨成粉末。 

2 迅速將研磨好的樣本加入預先裝有350 μl裂解液 PA的離心管中（請先檢查是否加入DTT），用槍頭吹打混勻后，依次加入40 μl RNase (20mg/ml) 、50 μl裂解液PB，渦旋混勻，65℃孵育10-30 min。 

3 向上一步離心管中加入130 μl沉淀緩沖液，震蕩混勻，直至出現沉淀。

4 12,000 rpm（~13,400×g），離心5min，小心將全部上清轉移到新的離心管中。

DNA提取

1 向樣本預處理步驟4的離心管中加入與上清等體積的異丙醇，混勻，全部轉移到吸附柱AP20中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm（~13,400×g）離 心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱AP20重新放入收集管中。

2 向吸附柱AP20中加入600μl洗滌液 I（請先檢查是否加入無水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱AP20重新放入收集管中。

3 向吸附柱AP20中加入600μl 洗滌液 II（請先檢查是否加入無水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱AP 20放入收集管中。

4 重復操作步驟3。

5 將吸附柱AP20放入收集管中，12,000rpm（~13,400×g）離心2min，目的是將吸附柱中殘余的洗滌液 II去除，將吸附柱AP20置于室 溫放置數分鐘，徹底晾干，以防止洗滌液 II中殘留的乙醇影響下一步實驗。

6 將吸附柱AP20置于一個干凈的離心管中，向吸附柱膜的中間部位滴加50-100μl洗脫液，室溫放置2min，12,000rpm（~13,400×g）離 心2min將產物收集到離心管中，即為植物基因組DNA，如不立即進行下游實驗，于-20℃保存備用。