RNase GG
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 | 價格 |
NBS8239 | RNase GG | 2500U(50U/μl) | 1250 |
產品簡介:
本產品來源于嗜熱古菌,經重組表達純化后獲得。RNase GG是一種核糖核酸內切酶,特異性識別并切割單鏈或雙鏈RNA中的GG位點,不切割ssDNA、dsDNA。RNase GG對二級結構處的GG位點也可以高效切割,十分有利于分析存在復雜結構的RNA。RNase GG極度耐熱,在37~95℃間均具有活性,在60~70℃活性最佳。RNase GG發揮活性不依賴于金屬離子,可兼容大部分RNA研究中常用的緩沖液。
識別位點:GG
5'...G ↓ G ...3'
產品組成:
組分 | 規格 |
RNase GG (50 U/μl) | 50 μl |
10× RNase GG Buffer | 1 ml |
保存條件:
-20℃保存,2年有效。
建議反應條件:
1× RNase GG Buffer;60℃溫育。
失活條件:
終濃度1% SDS,95℃3 min。
活性定義:
1個活性單位(U)是指在37℃下,30 min內完全切割2 pmol含有單個G/G位點的40 nt RNA底物所需的酶量。
蛋白純度:
經SDS-PAGE 凝膠電泳檢測,蛋白純度不低于95%。
非特異性DNA內切酶活性:
37℃下,在20 μl反應體系中將50 U RNase GG與200 ng超螺旋質粒DNA共同溫育4 h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,少于20%的質粒DNA轉變成缺刻或線性狀態。
RNase活性:
37℃下,在10 μl反應體系中將50 U RNase GG與不含GG位點的RNA共同溫育1 h,使用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,RNA無變化。
DNase活性:
37℃下,在20 μl反應體系中將50 U RNase GG與15 ng雙鏈 DNA片段共同溫育16 h,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,雙鏈DNA片段無變化。
使用方法:
1. 推薦體系
① 在冰上按如下建議的加樣順序配制反應體系:
RNA底物 | 10 μg |
10× RNase GG Buffer | 2 μl |
RNase GG (50 U/μl) | 1 μl |
RNase Inhibitor, Murine (40 U/μl)(可選) | 1~2 μl |
ddH2O | Up to 20 μl |
② 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻(切勿渦旋),瞬時離心;
③ 60℃恒溫孵育1 h,可根據不同的應用調節反應時間和酶的用量;
④(可選)終止反應:向反應體系中加入終濃度1%的SDS并95℃ 溫育3 min。
注意事項:
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅用于生命科學研究,不得用于醫學診斷及其他用途!