5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate pH熒光探針

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞內(nèi)pH在許多細(xì)胞事件起著重要的調(diào)節(jié)作用，這些事件包括細(xì)胞生長、鈣調(diào)節(jié)、酶活力、受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、離子轉(zhuǎn)運、內(nèi)吞、趨化性、細(xì)胞黏附和其他細(xì)胞進程。發(fā)射pH敏感的熒光探針普遍用來監(jiān)測胞內(nèi)pH變化。使用pH熒光探針的成像技術(shù)允許研究人員以更高的空間分辨率調(diào)研這些事件，采樣密度可通過其他技術(shù)比如微電極來完成。

5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate，常簡稱為Carboxy SNARF-1 AM，是一種細(xì)胞膜滲透性的pH熒光探針，胞內(nèi)去酯化后的pKa約為7.5，因此，適用于測定pH 7.0-8.0之間的pH變化。Carboxy SNARF-1在酸性和堿性條件下呈現(xiàn)出顯著的pH依賴發(fā)射光遷移，從黃-橙色遷移到深紅色熒光。這一pH依賴性允許其測定雙發(fā)射波長（通常為580nm和640nm）下的熒光強度比率，從而用來定量測定pH。

Carboxy SNARF-1特別適合帶可見光固定波長激發(fā)源的儀器，包括共聚焦掃描顯微鏡、流式細(xì)胞儀和熒光酶標(biāo)儀。該染料用氬離子激光器（488nm和514nm）都能良好激發(fā)。聯(lián)合Fura-2、Fluo-3和Indo-1能同時測定胞內(nèi)pH和鈣離子。

產(chǎn)品特性：

1）  CAS NO：126208-13-7

2）  化學(xué)名：Spiro[7H-benzo[c]xanthene-7,1'(3H)isobenzofuran]-ar'-carboxylic acid, 3-(acetyloxy)-10- (dimethylamino)-3'-oxo-, (acetyloxy)methyl ester

3）  同義名：Carboxy SNARF-1 AM；C-SNARF-1 AM; 5-(6)-Carboxy RhodFluor, acetoxymethyl ester, acetate;

4）  分子式：C₃₂H₂₅NO₉

5）  分子量：567.55

6）  Ex/Em：激發(fā)波長（4888~530nm），發(fā)射波長（580nm and 640nm）

7）  溶解性：溶于DMSO

保存條件: 

20℃避光干燥保存，至少1年有效。

產(chǎn)品使用： 應(yīng)用示例（來自文獻資源）

Ramshesh VK, Lemasters JJ. Imaging of mitochondrial pH using SNARF-1. Methods Mol Biol. 2012;810:243-248. doi:10.1007/978-1-61779-382-0_16. PMID: 22057572

SNARF-1加載方法：為了加載SNARF-1，培養(yǎng)的心肌細(xì)胞用5μM SNARF-1, Acetoxymethyl Ester（SNARF-1 AM）于37℃孵育45min。孵育過程中，胞內(nèi)酯酶水解探針釋放SNARF-1 free acid使其保留在細(xì)胞漿內(nèi)。細(xì)胞用KRH清洗兩遍，之后置于KRH或其它生理培養(yǎng)液內(nèi)于顯微鏡下觀察。與其它的AM加載探針不同，SNARF-1能很好的加載進入線粒體，雖然這類加載可能具細(xì)胞特異性。為了促進更好的線粒體吸收，細(xì)胞用SNARF-1 AM在更低的溫度（4-12℃）孵育更長的時間。

Fig Confocal SNARF-1 ratio images of intracellular pH. A 1-day cultured cardiac myocyte was loaded with SNARF-1-AM (5 μM) for 45 min in culture medium at 37°C, and intracellular pH was measured by ratio imaging of SNARF-1 fluorescence before (baseline) and after 30, 40, and 42 min of chemical hypoxia.

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅問題，操作或保存過程中盡量避光，減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。