核酸染色劑

LDS 751 Nucleic Acid Stain

產品簡介：

LDS 751是一種細胞膜通透性的核酸染色劑，用于從無核和受損的有核細胞中區分完整的有核細胞，以及在混合的中性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞中用流式細胞術區分不同的細胞類型。LDS 751與dsDNA結合的最大激發波長~543nm，能用488nm氬離子激光器來激發，由于具有較長的最大發射波長 (～712 nm) 而特別適用于多色分析。與dsDNA的結合引起~20倍的熒光增強。噻唑橙（主要結合RNA，貨號：NBS7693）和LDS 751（主要結合DNA）用來區分紅細胞、血小板、網織紅血球和有核細胞。

產品特性：

1） CAS NO.：181885-68-7

2） 化學名：Quinolinium, 6-(dimethylamino)-2-[4-[4-(dimethylamino)phenyl]-1,3-butadienyl]-1-ethyl, perchlorate

3） 同義名：Laser dye styryl-751; LDS-751;

4） 分子式：C₂₅H₃₀ClN₃O₄

5） 分子量：471.98

6） 外觀：固體

7） 溶解性：溶于DMSO

8） Ex/Em：~543?712nm（與DNA結合）

9）化學結構圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。 

產品使用：

【注意】：以下步驟適用于大多數細胞類型。生長培養基、細胞密度、是否存在其它細胞類型都可能影響染色。玻璃表面殘留的去污劑也可能影響許多有機體的染色結果，在含或不含細胞的溶液內都可能看到明亮的染色材料。

1）制備5-10mM的DMSO儲存液，比如：往25mg LDS 751粉末（MW：471.98）內加入5.297ml DMSO充分溶解，即得到10mM的儲存液，根據單次用量分裝，置于-20℃避光保存，避免反復凍融。

2）加1-10μM染色工作液到細胞內（或懸浮細胞，或貼壁細胞），染色15-60min。第一次實驗務必嘗試幾種染色濃度，以確定最佳的工作濃度。高染料濃度很可能引起其它細胞結構的非特異染色。

3）直接用合適的儀器比如流式細胞儀，熒光酶標板等來觀察染色結果。

染色示例（來自文獻，僅作參考）

實驗目的：研究中性粒細胞對細菌的吞噬比例； 

實驗方法：吞噬前和吞噬后的樣本分別用FACSVerse流式細胞儀收集數據。為了同時獲取細菌（~1 μm直徑）和中性粒細胞（~12 μm），對數模式設置FSC和SSC參數。為了消除FSC和SSC的滿程對數擴增引起的大量背景事件，吞噬后的中性粒細胞用LDS-751核酸染色劑（0.3 μg/ml） 于4℃孵育5min，不用沖洗。GFP（S. aureus）和LDS-751（PerCP 通道設置）（中性粒細胞）信號以對數形式收集，兩者用作閾值信號。獲取事件總數為50,000。

注意事項：

1.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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