<BK0045> ACE 染色質免疫共沉淀（CHIP）試劑盒
染色質免疫共沉淀（CHIP）試劑盒
產品線 | 產品目錄名稱 | 規格 | 貨號 | 目錄價 |
分子互作 | 染色質免疫共沉淀（CHIP）試劑盒 | 24 T | BK0045-01 | 4000 |
產品介紹
染色質免疫共沉淀試劑盒，也稱ChIP（Chromatin Immunoprecipitation）試劑盒，是ChIP相關實驗流程中最重要的一環。ChIP是在活細胞狀態下， 通過甲醛固定使蛋白質與DNA形成復合物，并通過超聲的方法將其隨機切斷成一定長度范圍內的染色質小片段，然后再通過抗原抗體特異性結合反 應，富集與目的蛋白結合的DNA片段，解交聯后分離、純化DNA，獲取的DNA經檢測分析，從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。 該試劑盒包含含BoxA、BoxB和BoxC，可進行24次獨立的染色質免疫沉淀（ChIP）反應。經驗證，試劑盒中提供的rProtein A/G MagPoly Beads， 能更好的免疫沉淀染色質。在蛋白質-DNA解交聯后，DNA使用離心柱法進行純化，方便快捷，無需進行苯酚/氯仿提取和乙醇沉淀。目的DNA序列 的富集可通過標準PCR、qPCR或測序等各種方法進行分析。
表1.ChromatinImmunoprecipitation（ChIP）Kit產品組分
產品序號 | 產品名稱 | 規格(8T) | 規格(24T) | 保存溫度 | |
BOX A | 1 | rProteinA/G MagPoly Beads | 0.3 mL | 1 mL | 2–8°C |
2 | Glycine Solution (2.5M) | 8 mL | 12.5 mL × 2 | ||
3 | ChIP Sonication Buffer | 8 mL | 25 mL | ||
4 | ChIP Buffer | 3 mL | 10 mL | ||
5 | High Salt and Lysis Buffer | 17.5 mL × 2 | 100 mL | ||
6 | Low Salt Buffer | 20 mL | 60 mL | ||
7 | TE Buffer | 8 mL | 25 mL | ||
BOX B | 8 | DNA BL Buffer | 5 mL | 15 mL | RT |
9 | DNA Binding Buffer | 5 mL | 15 mL | ||
10 | DNA Wash Buffer | 15 mL | 40 mL | ||
11 | DNA Elution Buffer | 1 mL | 1 mL | ||
12 | RNase free ddH?O | 1 mL | 1 mL | ||
13 | Purification Column | 10 個 | 30 個 | ||
14 | Collection Tube | 10 個 | 30 個 | ||
BOX C | 15 | Protease inhibitors (100×) | 0.3 mL | 1 mL | -20°C |
16 | Proteinase K (10 mg/mL) | 70 μL | 200 μL | ||
17 | RNase (10 mg/mL) | 70 μL | 200 μL | ||
實驗準備及注意事項
1 試劑的準備
- 1×PBS
- 37%甲醛（分子級別）
- 1.5%瓊脂糖凝膠
- ChIP級目的抗體
- 與目的抗體同種屬IgG對照抗體
- 用于PCR或qPCR檢測試劑盒
2 設備及耗材的準備
- 磁力架
- 超聲波細胞破碎儀
- 渦旋振蕩器
- 微量離心機
- 水浴鍋
- 計時器
- 可變容量移液器（10μL-1000μL）+相關吸頭
- 1.5mL無RNase微量離心管
- 15mL無RNase離心管
- PCR儀
- PCR管
3 注意事項
1) 試劑盒采用冰袋運輸，收貨后，取出BoxA置于2-8℃，BoxB置于室溫，BoxC置于-20℃保存，避免陽光直射。
2) Protease inhibitors 為一種細胞毒性化學物質，建議在通風櫥或經認證的生物實驗臺中使用，且注意避光保存。
操作步驟
具體操作步驟請參考說明書
公司名稱：上海諾寧生物科技有限公司
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